my story

Mitosis

Mitosis adalah cara reproduksi sel dimana sel membelah melalui tahap-tahap yang teratur, yaitu Profase Metafase-Anafase-Telofase. Antara tahap telofase ke tahap profase berikutnya terdapat masa istirahat sel yang dinarnakan Interfase (tahap ini tidak termasuk tahap pembelahan sel). Pada tahap interfase inti sel melakukan sintesis bahan-bahan inti.

Pembelahan (mitosis), memiliki 4 fase yaitu:

a. Profase (fase awal)

Pada periode ini terjadi perubahan pada nucleus dan sitoplasma. Pada nucleus, nukleuli menghilang. Serabut-serabut kromatin menjadi lebih menggulung rapat dan melipat sehingga kian pendek dan tebal berubah menjadi kromosom, yang besar dan tampak jelas. Kromosom kemudian berduplikasi menjadi dua kromatid anak yang sama, dan kemudian bergabung pada sentromer. Spindle mitosis terbentuk di sitoplasma, tersusun dari mikrotubul dan bergabung dengan protein, tersusun teratur di antara dua sentrosom. Selama profase sentrosom bergerak berlawanan satu sama lain dan nampaknya bergerak sepanjang permukaan inti melalui pemanjangan berkas mikrotubul diantara dua sentrosom.

b. Prometafase

Selama prometafase membrane inti terpotong-potong. Mikrotubul dari spindle sekarang dapat masuk ke dalam inti dan berhubungan dengan kromosom yang telah menjadi lebih padat. Berkas mikrotubul dinamakan serabut spindel, yang meluas dari setiap kutub kea rah ekuator sel. Setiap kromatid dari kromosom kini memiliki struktur khusus yang dinamakan kinetokor, yang terletak pada daerah sentromer. Mikrotubul yang menambat pada kinetokor dinamakan mikrotubul-kinetokor. Struktur ini menyebabkan kromosom bergerak. Mikrotubul yang lain, mikrotubul-nonkinetokor, tersusun radier dari kutub menuju ke ekuator sel tanpa menambat pada kromosom.

c. Metafase

Sentrosom berada pada kedua kutub sel yang berlawanan. Kromosom berada pada bidang metaphase, bidang yang mempunyai jarak yang sama antara spindle kedua kutub. Spindel sentromer dari semua kromosom lurus satu sama lain pada bidang metaphase. Untuk setiap kromosom, kinetokor dari permukaan kromatid anak berlawanan kutub sel. Karena itu kromatid yang sama dari setiap kromosom menambat pada mikrotubul-kinetokor yang tersusun radier dari kutub yang berlawanan dari sel induk. (Serat gelendong terbentuk sempurna antara kutub, kromosom menggantung pada serat gelendong tersebut lewat sentromernya, dan semua bergerak ke bidang ekuator hingga kromosom terletak pada satu bidang datar)

d. Anafase (fase kembalinya kromosom ke kutub bersebrangan.)

Sentromer dari setiap kromosom mengganda, sehingga setiap kromatid memiliki sentromer sendiri-sendiri. Setiap kromatid sekarang dianggap sebagai calon kromosom. Spindle mulai menggerakkan kromatid menuju kutub sel yang berlawanan. Hal ini dikarenakan mikrotubul kinetokor menambat pada sentromer. Mikrotubul kinetokor memendek ketika kromosom mendekati kutub sel. Pada saat yang bersamaan kutub dari sel juga bergerak lebih jauh. Akhir dari anafase kedua kutub sel sama jaraknya dan merupakan kumpulan dari kromosom.

e. Telofase (fase akhir. Pada fase ini sel induk menjadi dua sel anak.)

Pada fase telofase, mikrotubul nonkinetokor selalu memanjang dan anak inti mulai terbentuk pada kedua kutub sel, dan kromosom berada dalam keadaan terhimpun. Membrane inti terbentuk dari potongan-potongan membrane inti sel induk dan bagian lain dari system endomembran. Pada fase profase dan prometafase selanjutnya nucleoli nampak kembali dan serabut kromatin dari masing-masing kromosom menjadi kurang erat memilin. Mitosis merupakan pembelahan dari satu inti menjadi dua inti yang secara genetic sama.

Meiosis

Meiosis adalah bentuk pembelahan inti yang sangat penting diantara reproduksi seksual organisme. Meiosis terjadi pada organisme ekuariot, yang selnya mengandung jumlah kromosom diploid. Dioploid berarti rangkap, dalam artian bahwa informasi genetik pada salah satu kromosom dapat dijumpai pada bentuk yang sama ( atau termodifikasi) pada kromosom kedua didalam inti. Kedua kromosom membentuk pasangan sedemikian yang dinamakan homolog. Sel diploid manusia mengandung 46 kromosom, atau 23 pasang homolog ke 46 kromosom dari zigote terbentuk dari fertilisasi, yang berasal dari sel sperma dan sl telur yang masing-masing gamet memberikan satu anggotanya dari setiap pasangan homolognya.

Pemembelahan meiosis terdiri atas 2 tahap yaitu:

1. Meiosis pertama (I)

2. Meiosis kedua (II).

Masing-masing memiliki ke-4 fase: profase, metafase, anafase, dan telofase. Istirahat antara kedua tahap disebut interkinesis. Profase meiosis I dibagi atas 5 sub-tahap: leptoten, zigoten, pakiten, diloten, dan diakinesis.

1. Meiosis I

a. Interfase I

Meiosis didahului oleh interfase, dimana setiap kromosom mengalami proses replikasi. Proses ini menyerupai pada replikasi kromososm mitosis. Untuk setiap kromosom, stiap kromatid ( anak) menyerupai sifat genetik yang sama menambat pada sntromer. Ada sepasang sentriol (pada sel hewan) juga mengalami replikasi untuk membentuk dua pasang.

b. Profase I

Profase meiosis I dibagi atas 5 sub-tahap: leptoten, zigoten, pakiten, diloten, dan diakinesis.

1) Leptoten

Kromatin terpilin menjadi kromosom. Terdapat 2 pasang kromosom homolog

2) Zigoten

Kromosom homolog mengandeng; sebelah berasal dari kromosom induk (kromosom matroklin) dan sebelah lain dari kromosom bapak (kromosom patroklin). Dibeberapa tempat terjadi persilangan (chiasma; jamak: chiasmata).

3) Pakiten

Kromosom homolog mengandeng rapat sepanjang lengannya, dari pangkal ke ujung terbentuk tetrade.

4) Diploten

Setiap kromosom membelah longitudinal membentuk dua kromatid, sentromer masih satu terjadi chiasmata pada beberapa tempat natara kromatid homolog; dari chiasmata timbul crossing over.

5) Diakinesis

Kromosam (kromatid) mencapai pilinan maksimal, sehingga mencapai besar maksimal pula. Kromosom homolog merenggang, nukleus menghilang, selapu inti hancur, sentriol menganda dan setiap pasang menuju kutub berseberangan.

c. Metafase I

Selapu inti menghilang, serat gelondong terbentuk anatara kedua pasang sentriol, yang terdiri dari: mikrotubuli dan mikrofilia. Kromosom (berpasangan homolog) bergerak ke bidang ekuator.

d. Anafase I

Sel memanjang dari kutub ke kutub. Kromosom homolog berpisah ke kutub berseberangan dan kromatid belum terbentuk.

e. Telofase I

Selaput inti terbentuk kembali. Sepasang sentriol berada dipinggir luar selaput. Cytokinesis terjadi, sehingga sel induk menjadi sel anak. Gametosit I pada akhir meiosis I menjadi gametosit II.

2. Meiosis II

a. Profase II

Masanya pendek sekali. Selaput inti hilang. Sentriol mengganda dan menuju ke kutub berseberangan inti. Kromatid disetiap kromosom belum terpia=sah. Sentromer masih satu.

b. Metafase II

Serat gelondong terbentuk antara pasangan sentriol. Kromosom (sepasang kromatid) yang menggatung pada serat gelondong lewat sentromer pindah ke bidang equator.

c. Anafase II

Sel memanjang dari kutub ke kutub menurut poros serat gelondong. Sentromer pada setiap pasangan kromatid membelah sehingga kromatid bersaudara lepas. Kromatid berpisah dan bergerak ke kutub berseberangan.

d. Telofase II

Kromatid terbuka kembali pilinannya, terlepas-lepas, menjadi jala halus: kromatin. Selaput inti terbentuk kembali. Nucleolus muncul, melekat pada kromatin. Terjadi sitokinesis, sehingga dari dua gametaosit II terbentuk 4 gametid. Gametid mengandung kromosom separuh dari sel induk, dari 2N pada gametosit I, menjadi 1N pada gametid.
Dengan proses transformasi gametid nanti akan berubah menjadi gamet, yakni sel benih matang. Meiosis menghasilkan gamet yang mengandung bahan genetis yang:
1. Separuh dari bahan gametogonium
2. Bervariasi, karena terjadinya crossing over pada profase I

Perbedaan Antara Mitosis dan Meiosis

Perbedaan Mitosis Meiosis

Interfase lama sebentar
Profase Sebentar; tidak ada subfase; hanya sekali Agak lama; dibagi atas subfase pada meiosis I; 2x; frofase II kromatid tidak menggandakan lagi
Terbentuknya kromosom Awal profase Pertengahan profase: pakiten
Kromosom homolog Tidak bergandeng Bergandengan pada zigoten sampai anafase meiosis I
Dan diploidTetrad, synapsis, metafase Tidak terbentuk Terbentuk pada pakiten dan diploid
Metafase, sentromer Membagi 2 sehingga kromatid berpisah Metafase I: belum menbagi 2
Metafase II: membagi 2
Anafase, kromatid Pindah ke kutub berseberangan Anafase I: kromosomhomolog pindah ke kutub berseberangan
Anafase II: kromatid pindah ke kutub bersebernaga
Telofase Terbentuk 2 sel anak masing-masing 2N Telofase I: terbentuk 2 sel anak masing-masing 2N
Telofase II: terbentuk 4 sel anak masing-masing 1N
Interkinesis Tidak ada Ada, antara meiosis I dan meiosis II
Terjadi pada Jaringan somatif dan germinatif Hanya pada germinatif

Hukum Mendel

Hukum Mendel I adalah mengenai pemisahan gen sealel atau dikenal pula dengan Hukum Segregasi. Peristiwa pemisahan alel ini terlihat ketika pembuatan gamet individu yang memiliki genotipe heterozigot, sehingga tiap gamet mengandung salah satu alel itu. Dasar hukum Mendel I adalah penyilangan dua individu yang memiliki satu karakter beda (=Monohibrid).

Mendel menyilangkan kacang kapri normal (tinggi/TT) dengan kacang kapri kerdil (rendah/tt). Keturunan pertama (F1) yang didapat adalah kacang normal (Tt). Kemudian F1 tersebut disilangkan sesamanya (Tt x Tt) dan didapat keturunan berikut (F2) yaitu sebagian normal (TT dan Tt) dan sebagian kerdil (tt). Terlihat bahwa karakter normal pada keturunan pertama menghasilkan satu karakter saja namun pada keturunan kedua kedua karakter itu berpisah kembali. Kacang bergenotipe TT dan Tt memiliki fenotipe yang sama yaitu normal. Karakter t untuk kerdil karena resesif, ditutupi oleh karakter T yang menumbuhkan karakter normal. Jadi karakter normal adalah dominan. Perbandingan/rasio fenotipe pada turunan kedua antara karakter normal dan kerdil adalah 1 normal : 2 normal : 1 kerdil (disingkat 3 normal : 1 kerdil) sedangkan ratio genotipenya adalah 1 TT : 2 Tt : 1 tt . Turunan pertama disebut P (parental) dan keturunan dari parental disebut F (filial). Anak dari parental disebut F1 dan cucu dari parental disebut F2 (berasal dari perkawinan antara F1 dengan F1).

Bila parental adalah warna biji kuning (YY) dan warna biji hijau (yy), bagaimana kira-kira fenotipe dan genotipe dari F3 ???? Cobalah bereksperimen sendiri !!!

Ingat pada patokan baik pada F2 maupun F3 bahwa setiap karakter dikawinkan dengan karakter yang sama. (kunci jawaban: terdapat tiga jenis karakter, yaitu kuning (100%), kuning (75%) : hijau (25%) dan hijau (100%).

Hukum Mendel II adalah mengenai Pengelompokan Gen Secara Bebas (“Independent assortment of genes”) dan dikenal juga dengan Hukum Asortasi. Hukum ini berlaku ketika terjadi pembentukan gamet (peristiwa Meiosis) dimana gen sealel memisah secara bebas (tidak saling mempengaruhi) pergi ke masing-masing kutub. Dasar hukum Mendel II adalah penyilangan dari individu yang memiliki 2 atau lebih karakter beda (=dihibrid atau polihibrid). Bila ada 2 pasang gen A-a dan B-b pada awal meiosis. Maka pada akhir meiosis akan terbentuk 4 macam gamet yaitu AB, ab, Ab dan aB. Gamet AB dan gamet ab disebut memiliki kombinasi/pengelompokan asli (=kombinasi parental). Sedangkan gamet Ab dan gamet aB disebut memiliki kombinasi/pengelompokan baru (=rekombinan). Disinilah berlakunya Hukum Mendel II yaitu saat terjadinya meiosis pada gametogonium yang memiliki genotipe double-heterozigot, triple heterozigot, dst.

Bila pasangan gen parental dihibrid adalah AABB dan aabb maka pasangan F1-nya adalah AaBb (double-heterozigot) dengan macam gamet F1 adalah AB, Ab, aB dan ab. Kombinasi fenotipe F1 adalah 4 kelas. Bila F1 disilang inter-se maka F2-nya adalah 4 x 4 kolom = 16. Bila pasangan gen parental trihibrid adalah AABBCC dan aabbcc maka pasangan F1-nya adalah AaBbCc (triple-heterozigot) dengan macam gamet F1 adalah ABC,Abc, AbC, Abc, aBC, aBc, abC dan abc. Ratio gamet F1 pada perkawinan trihibrid adalah 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1 : 1, artinya kesempatan untuk berasortasi antara ketiga gen dengan alel masing-masing adalah sama. Bila F1 disilang inter-se maka F2-nya adalah 8 x 8 kolom = 64. Dapat pula menggunakan cara “Garis Garpu”

(dari berbagai sumber)

Unsur  hara

Unsur hara makro meliputi: C, H, O, N, P, K, Ca, Mg, S

Unsur Hara Mikro meliputi : Fe, Mn, B, Mo, Cu, Zn, Cl

1. Karbon (C)

Penting sebagai pembangun bahan organik karena sebagian besar bahan kering tanaman terdiri dari bahan organik, diambil tanaman berupa C02.

2. Oksigen

Terdapat dalam bahan organik sebagai atom dan termasuk pembangunan bahan organik, diambil dari tanaman berupa C02, sumbernya tidak terbatas dan diperlukan untuk bernafas.

3. Hidrogen

Merupakan elemen pokok pembangunan bahan organik, sumbernya dari air dan jumlahnya tidak terbatas.

4. Nitrogen N

Kelebihan       :Kelebihan nitrogen menyebabkan pertumbuhan vegetatif memanjang (lambat panen), Mudah rebah, Menurunkan kualitas bulir, Respon terhadap serangan hama/ penyakit.

Kekurangan   : Pertumbuhannya kerdil, Daun tampak kekuning-kuningan, Sistem perakaran terbatas.

Fungsi : Diperlukan untuk pembentukan atau pertumbuhan bagian vegetatif tanaman, seperti daun, batang dan akar,  Berperan penting dalam hal pembentukan hijau daun yang berguna sekali dalam proses fotosintesis, Membentuk protein, lemak dan berbagai persenyawaan organic, Meningkatkan mutu tanaman penghasil daun-daunan, Meningkatkan perkembangbiakan mikro-organisme di dalam tanah.

5. Fosfor P

Kelebihan       : menyebabkan kekurangan unsure mikro yang tersedia di dalam tanah, tanaman akan mempunyai nitrogen yang rendah, mengakibatkan ketidak seimbangan unsure-unsur hara, mengurangi populasi nematode.

Kekurangan   : Pertumbuhan kerdil, Jumlah anakan sedikit w, Daun meruncing berwarna hijau gelap.

Fungsi : Merangsang pertumbuhan akar, khususnya akar benih/tanaman muda, Mempercepat serta memperkuat pertumbuhan tanaman muda menjadi tanaman dewasa dan menaikkan prosentase bunga menjadi buah/biji, Membantu asimilasi dan pernafasan sekaligus mempercepat pembungaan dan pemasakan buah, biji atau gabah, Sebagai bahan mentah untuk pembentukan sejumlah protein tertentu.

6. Kalium

Kelebihan : dapat menyebabkan daun cepat menua sebagai akibat kadar

magnesium daun dapat menurun, kadang-kadang menjadi tingkat terendah

sehingga aktifitas fotosintesa terganggu.

Kekurangan : Pertumbuhan kerdil, Daun kelihatan kering dan terbakar pada sisi-sisinya, Menghambat pembentukan hidrat arang pada biji, Permukaan daun memperlihatkan gejala klorotik yang tidak merata, Munculnya bercak coklat mirip gejala penyakit pada bagian yang berwarna hijau gelap.

Fungsi : Membantu pembentukan protein dan karbohidrat, Berperan memperkuat tubuh tanaman, mengeraskan jerami dan bagian kayu tanaman, agar daun, bunga dan buah tidak mudah gugur, Meningkatkan daya tahan tanaman terhadap kekeringan dan penyakit, Meningkatkan mutu dari biji/buah.

7. Kalsium

Kelebihan       : menyebabkan kalsium karbonat mengendap dan Ph penyangga mendekati 8 sehingga akan mengakibatkan turunnya kelarutan fosfor, besi, Mo, dan Zn, dan kadang-kadang menyababkan kekabatan satu atau lebih hara-hara tanaman esensial.

Kekurangan   : kerusakan sel-sel apical pada tunas dan daun, dan tunas dan daun akan menjadi mati setelah gejala kekeringan.

Fungsi             : Merangsang pembentukan bulu-bulu akar, Berperan dalam pembuatan protein atau bagian yang aktif dari tanaman, Memperkeras batang tanaman dan sekaligus merangsang pembentukan biji, Menetralisir asam-asam organik yang dihasilkan pada saat metabolism, Kalsium yang terdapat dalam batang dan daun dapat menetralisirkan senyawa atau suasana keasaman tanah.

8. Magnesium

Kelebihan       : menyebabkan terganggunya pertumbuhan tanaman, pertumbuhan perakaran akan terganggu dan daun akan mengalami gangguan.

Kekurangan   : menyebabkan bercak kuning pada daun, terlalu banyak menggunakan kalium dalam tanah yang kandungan Mgnya rendah, daun-daun menjadi hijau pucat/kuning pucat.

Fungsi             : Magnesium merupakan bagian tanaman dari klorofil, Merupakan salah satu bagian enzim yang disebut Organic pyrophosphatse dan Carboxy peptisida, Berperan dalam pembentukan buah.

9. Sulfur

Kelebihan       : tanaman tidak menunjukan kelinan yang berarti.

Kekurangan   : pucuk daun menguning dan kerdil serta bunga banyak tetapi cepat rontok.

Fungsi             : Berperan dalam pembentukan bintil-bintil akar, Merupakan unsur yang penting dalam beberapa jenis protein dalam bentuk cystein, methionin serta thiamine, Membantu pertumbuhan anakan produktif, Merupakan bagian penting pada tanaman-tanaman penghasil minyak, sayuran seperti cabai, kubis dan lain-lain, Membantu pembentukan butir hijau daun.

10.  Besi

Kelebihan       : akan timbul bercak nekrosis kecil-kecil pada daun dan akhirnya daun akan rontok, warna akan menjadi jelek, coklat dan kasar.

Kekurangan   : Kekurangan besi dapat disebabkan oleh drainase yang kurang atau tingginya konsentrasi ion-ion metal dalam tanah. Ketersediaan besi menurun pada pH diatas 7. Selain itu, toksisitas mangan dapat menyebabakan defisiensi besi. Defisiensi besi menyebabkan klorosis hijau pucat pada daun termuda. Jika defisiensi terus berlanjut, urat daun menjadi pucat dan daun seperti terbakar, terutama jika daun terdedah ke sinar matahari dengan intensitas kuat.

Fungsi             : Zat besi penting bagi pembentukan hijau daun (klorofil), Berperan penting dalam pembentukan karbohidrat, lemak dan protein, Zat besi terdapat dalam enzim Catalase, Peroksidase, Prinodic hidroginase dan Cytohrom oxidase

11.  Mangan

Kelebihan       : menyebabkan keracunan dan menekan penyerapan Fe oleh akar tanaman.

Kekurangan   : Tanaman yang kekurangan mangan mempunyai daun yang khlorotik, tetapi bagian-bagian daun sepanjang tulang-daunnya berwarna hijau. Daun-daun tersebut kemudian akan berwarna coklat dan mati.

Fungsi             : Diperlukan oleh tanaman untuk pembentukan protein dan vitamin terutama vitamin C, Berperan penting dalam mempertahankan kondisi hijau daun pada daun yang tua, Berperan sebagai enzim feroksidase dan sebagai aktifator macam-macam enzim,  Berperan sebagai komponen penting untuk lancarnya proses asimilasi.

12.  Boron

Kelebihan       : ujung daun kuning dan mengalami kerusakan berupa daun menjadi kecoklatan.

Kekurangan   : Pertumbuhan tanaman yang kekurangan boron menjadi terhambat. Pangkal dari daun yang baru terbentuk berwarna hijau muda perakarannya pendek-pendek dan tebal serta berwarna kecoklat—coklatan. Ujung akarnya akan mati sehingga merangsang pembentukan akar baru yang tidak lama kemudian akan mati pula. Umbi yang kekurangan boron berukuran kecil dan seringkali permukaannya pecah-pecah atau busuk pada bagian tengahnya.

Fungsi             : Bertugas sebagai transportasi karbohidrat dalam tubuh tanaman, Meningkatkan mutu tanaman sayuran dan buah-buahan, Berperan dalam pembentukan/pembiakan sel terutama dalam titik tumbuh pucuk, juga dalam pembentukan tepung sari, bunga dan akar, Boron berhubungan erat dengan metabolisme Kalium (K) dan Kalsium (Ca), Unsur hara Bo dapat memperbanyak cabang-cabang nodule untuk memberikan banyak bakteri dan mencegah bakteri parasit

13.  Molybdenum

Kelebihan       : kelebihan Mo tidak menunjukan gejala nyata pada tanaman

Kekurangan   : Gejala kekurangan unsur molybdenum ini terutama terlihat pada daun tua dengan adanya bercak khlorotik yang kemudian menjadi nekrotik dan berlubang-lubang. Titik pertumbuhannya akan rusak dan mati.

Fungsi             : Berperan dalam mengikat (fiksasi) N oleh mikroba pada leguminosa, Sebagai katalisator dalam mereduksi N, Berguna bagi tanaman jeruk dan sayuran

14.  Tembaga

Kelebihan       : tanaman menjadi kerdil sebab perkembangan akar tidak normal, daun berguguran tanaman dan akhirnya mati.

Kekurangan   : Dengan kekurangan unsur tembaga maka tanaman dapat memperlihatkan die back pada percabangannya. Selain itu tepi daunnya menjadi khlorotik atau memperlihatkan gejala terbakar. Pembentukan bunga akan berkurang, perkembangannya akan terhambat dan seringkali menjadi rusak.

Fungsi             : Diperlukan dalam pembentukan enzim seperti: Ascorbic acid oxydase, Lacosa, Butirid Coenzim A. dehidrosenam, Berperan penting dalam pembentukan hijau daun (khlorofil)

15.  Seng

Kelebihan       : menyebabkan pucuk ranting mati, daun seperti terbakar, daun rontok dan pucuk akar akan menjadi rusak.

Kekurangan   : Gejala kekurangan unsur ini terlihat pada daun dengan warna khlorosa pada bagian-bagian di antara tulang-tulang daun. Bagian tersebut kemudian menjadi nekrotik. Daun-daunnya berukuran agak kecil, ruas batangnya pendek dan menghasilkan buah dalam jumlah yang sedikit. Unsur seng ini merupakan bagian dari sejumlah enzim untuk sintesa auksin dan untuk mengoksidasi hidrat karbon.

Fungsi             : Dalam jumlah yang sangat sedikit dapat berperan dalam mendorong perkembangan pertumbuhan, Diperkirakan persenyawaan Zn berfungsi dalam pembentukan hormon tumbuh (auxin) dan penting bagi keseimbangan fisiologis, Berperan dalam pertumbuhan vegetatif dan pertumbuhan biji/buah

16.  Klor

Kelebihan       : tanaman tercuni dengan gejala daun tampak menebal dan menggulung.

Kekurangan   : pertumbuhan akan terganggu, daun layu, berwarna kuning dan muncul bercak kuning dipermukaan daun.

Fungsi             : Memperbaiki dan meninggikan hasil kering dari tanaman seperti: tembakau, kapas, kentang dan tanaman sayuran, Banyak ditemukan dalam air sel semua bagian tanaman, Banyak terdapat pada tanaman yang mengandung serat seperti kapas, sisal.

(dari berbagai sumber)

PEMERIKSAAN BAKTERI SECARA MAKROSKOPIS
A. PERHITUNGAN BAKTERI
Perhitungan jumlah suatu bakteri dapat melalui berbagai macam uji seperti uji kualitatif koliform yang secara lengkap terdiri dari tiga tahap yaitu uji penduga (uji kuantitatif, bisa dengan metode MPN), uji penguat dan uji pelengkap. Waktu, mutu sampel, biaya, tujuan analisis merupakan beberapa faktor penentu dalam uji kualitatif koliform. Bakteri koliform dapat dihitung dengan menggunakan metode cawan petri (metode perhitungan secara tidak langsung yang didasarkan pada anggapan bahwa setiap sel yang dapat hidup akan berkembang menjadi satu koloni yang merupakan suatu indeks bagi jumlah organisme yang dapat hidup yang terdapat pada sampel) seperti yang dilakukan pada percobaan ini (Penn, 1991).
Beratus-ratus spesies dapat menghuni bermacam-macam bagian tubuh kita, termasuk mulut, saluran pencernaan, dan kulit (Pelczar & Chan, 1986). Koliform merupakan kelompok bakteri yang digunakan sebagai indikator adanya polusi kotoran dan kondisi sanitasi yang tidak baik terhadap air, makanan dan produk-produk susu. Bakteri koliform dapat dibedakan atas dua kelompok yaitu koliform fekal (Escherchia coli) dan koliform non fekal (Enterobacter aerogenes) (Fardiaz, 1996).
E. coli adalah bakteri koliform yang ada pada kotoran manusia, maka E. coli sering disebut sebagai koliform fekal. Pengukuran kuantitatif populasi mikroorganisme sangat diperlukan untuk berbagai macam penelaahan mikrobiologis. Berbagai macam cara dapat dilakukan untuk menghitung jumlah mikroorganisme, akan tetapi secara mendasar, ada dua cara yaitu secara langsung dan secara tidak langsung. Ada beberapa cara perhitungan secara langsung, antara lain adalah dengan membuat preparat dari austu bahan (preparat sederhana diwarnai atau tidak diwarnai) dan penggunaan ruang hitung (counting chamber). Sedangkan perhitungan cara tidak langsung hanya untuk mengetahui jumlah mikroorganisme pada suatu bahan yang masih hidup saja (viabel count). Dalam pelaksanaannya, ada beberapa cara yaitu : perhitungan pada cawan petri (total plate count / TPC), perhitungan melalui pengenceran, perhitungan jumlah terkecil atau terdekat (MPN methode), dan kalorimeter (cara kekeruhan atau turbidimetri) (Sutedjo, 1991).
Jumlah masing-masing cawan diamati setelah inkubasi, cawan yang dipilih untuk penghitungan koloni ialah yang mengandung antara 30 sampai 300 koloni, karena jumlah mikroorganisme dalam sampel tidak diketahui sebelumnya, maka untuk memperoleh sekurang-kurangnya satu cawan yang mengandung koloni dalam jumlah yang memenuhi syarat tersebut maka harus dilakukan sederetan pengenceran dan pencawanan. Jumlah organisme yang terdapat dalam sampel asal ditentukan dengan mengalikan jumlah koloni yang terbentuk dengan faktor pengenceran pada cawan yang bersangkutan (Penn, 1991). Metode perhitungan MPN sering digunakan dalam pengamatan untuk menghitung jumlah bakteri yang terdapat di dalam tanah seperti Nitrosomonas dan Nitrobacter. Kedua jenis bakteri ini memegang peranan penting dalam meningkatkan pertumbuhan dan produksi tanaman, sehubungan dengan kemampuannya dalam mengikat N2 dari udara dan mengubah amonium menjadi nitrat (Sutedjo, 1991).

B. PENGAMATAN KOLONI
C. MEMBUAT BIAKAN MURNI
Secara kebetulan seorang peneliti Jerman melihat bahwa koloni yang tumbuh pada kentang yang telah direbus pada akhirnya dapat menemukan jalan untuk memisah menjadi individu-individu. Caranya; mereka mengembangkan media spesifik untuk menumbuhkan mikroorganisme. Media adalah substansi yang memenuhi kebutuhan nutrisi mikroorganisme. Koch dan koleganyanya juga menunjukkan bahwa senyawa dari alga yang disebut agar dapat membuat media menjadi padat. Richard J.Petri (1852 – 1921) membuat piringan kaca bertutup untuk menempatkan media agar alat tersebut selanjutnya disebut Petri dish yang masih digunakan sampai sekarang. Pada tahun 1892, dengan menggunakan teknik biakan murni Koch dan anggotanya menemukan agen-agen penyebab typus, dipteri,tetanus, pneumonia dan lain sebagainya. Koch mengenalkan penggunaan binatang model untuk penyakit manusia dengan cara menginjeksikan bakteri ke dalam mencit,kelinci, babi atau domba. Ia bahkan menempelkan kamera pada mikroskopnya untuk mengambil gambar dan menggunakannya sebagai bukti untuk menghilangkan keraguan.
Membiakkan bakteri dapat dilakukan dengan berbagi cara, salah satunya pengembangbiakan dalam media cawan petri. Pengembangbiakan dalam cawan ini ada beberapa metode, yaitu :
1.Metode cawan gores (streak plate)
Metode cawan gores cukup sulit bagi pemula, terutama mahasiswa semester awal yang baru mengambil mata praktikum mikrobiologi. Kesulitan dari metode ini, yaitu proses penggoresan yang cukup lama dan sulit, sehingga memudahkan terjadinya kontaminasi dan kegagalan. Prinsip metode ini, yaitu mendapatkan koloni yang benar-benar terpisah dari koloni yang lain, sehingga mempermudah proses isolasi.
Cara ini dilakukan dengan membagi cawan petri menjadi 3-4 bagian. Ose steril yang telah disiapkan dilekatkan pada sumber isolat, kemudian menggoreskan ose tersebut pada cawan berisi media steril. Goresan dapat dilakukan 3-4 kali membentuk garis horisontal di satu sisi cawan. Ose disterilkan lagi dengan api bunsen, setelah kering ose tersebut digunakAn untuk menggores goresan sebelumnya pada sisi cawan kedua. Langkah ini dilanjutkan hingga keempat sisi cawan tergores.
Pada metode ini, goresan di sisi pertama diharapkan koloni tumbuh padat dan berhimpitan, sedangkan pada goresan sisi kedua, koloni mulai tampak jarang dan begitu pula selanjutnya, sehingga didapatkan koloni yang tampak tumbuh terpisah dengan koloni lain. Seluruh tahap hendaknya dilakukan secara aseptik agar tak terjadi kontaminasi.

2.Metode cawan tuang (pour plate)
Metode cawan tuang sangat mudah dilakukan karena tidak membutuhkan keterampilan khusus dengan hasil biakan yang cukup baik. Metode ini dilakukan dengan mengencerkan sumber isolat yang telah diketahui beratnya ke dalam 9 ml garam fisiologis (NaCl 0.85%) atau larutan buffer fosfat. Larutan ini berperan sebagi penyangga pH agar sel bakteri tidak rusak akibat menurunnya pH lingkungan. Pengenceran dapat dilakukan beberapa kali agar biakan yang didapatkan tidak terlalu padat atau memenuhu cawan (biakan terlalu padat akan mengganggu pengamatan).
Sekitar 1 ml suspensi dituang ke dalam cawan petri steril, dilanjutkan dengan menuangkan media penyubur (nutrien agar) steril hangat (40-50oC) kemudian ditutup rapat dan diletakkan dalam inkubator (37oC) selama 1-2 hari.
Penuangan dilakukan secara aseptik atau dalam kondisi steril agar tidak terjdi kontaminasi atau tumbuh atau masuknya organisme yang tidak diinginkan (di laboratorium, kontaminasi biasanya terjadi akibat tumbuhnya kapang, seperti Penicilium dalam biakan). Media yang dituang hendaknya tidak terlalu panas, karena selain mengganggu proses penuangan (media panas sebabkan tangan jadi panas juga), media panas masih mengeluarkan uap yang akan menempel pada cawan penutup, sehingga mengganggu proses pengamatan. pada metode ini, koloni akan tumbuh di dalam media agar. Kultur diletakkan terbalik, dimasukkan di dalam plastik dengan diikat kuat kemudian diletakkan dalam inkubator
3. Metode cawan sebar (spread plate)
Pada metode cawan sebar, 0.1 ml suspensi bakteri yang telah diencerkan (metode 3) disebar pada media penyubur steril yang telah disiapkan. Selanjutnya, suspensi dalam cawan diratakan dengan batang drygalski agar koloni tumbuh merata pada media dalam cawan tersebut, kemudian diletakkan dalam inkubator (37oC) selama 1-2 hari. Metode ini cukup sulit terutama saat meratakan suspensi dengan batang drygalski. Alih-alih koloni tumbuh merata, biakan justru terkontaminasi. Oleh karena itu, batang drygalski harus benar-benar steril, yaitu dengan mencelupkannya terlebih dahulu dalam alkohol kemudian dipanaskan dengan api bunsen. Perlu diingat, batang drygalski, yang masih panas akibat pemanasan dengan api bunsen, dapat merusak media agar, sehingga harus didinginkan terlebih dahulu dengan meletakkannya di sekitar api bunsen (±15 cm)
, dengan metode ini, satu sel bakteri akan tumbuh dan berkembang menjadi satu koloni bakteri. Satu koloni bakteri yang terpisah dengan koloni lainnya dapat diamati tipe pertumbuhan pada masing-masing media, diantaranya dilakukan terhadap konsistensi, bentuk koloni, warna koloni dan permukaan koloni.

Koloni yang tumbuh terpisah ditumbuhkan kembali untuk mendapatkan isolat murni. Isolasi murni dilakukan dengan mengoleskan ose steril pada koloni dalam kultur campuran yang benar-benar terpisah satu sama lain. Olesan tersebut digores pada media padat agar miring dalam tabung reaksi.

Koloni yang tumbuh dalam media ini merupakan isolat murni, yang hanya berasal dari satu jenis bakteri saja. Koloni yang tumbuh dapat dikarakerisasi berdasarkan tipe pertumbuhannya pada media agar miring.

Seluruh kultivasi atau penanaman sebaiknya dilakukan di dalam laminar air flow yang tertutup, untuk mengurangi resiko kontaminasi. LAF dilengkapi dengan lampu fluorescent, sinar UV dan kipas angin. Lampu fluorescent digunakan apabila kondisi cahaya di dalam LAF dan kamar isolasi kurang memadai. Sinar UV bersifat germisida yang dapat membunuh bakteri yang tidak diinginkan, sehingga dapat menurunkan resiko kontaminasi. Sebelum penanaman (kultivasi), alat2 yang digunakan sebaiknya dikenai sinar UV selama 5 menit (ingat, hanya alat2, seperti lampu bunsen, ose, pipet, dll).
laminar air flow di laboratorium mikrobiologi

D. TUJUAN